《表1 mMst1 3’UTR区引物序列》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《调节小鼠ste20样激酶1的miRNA的筛选与功能验证》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

设计并合成目的基因Mst1（ID∶6789）-3’UTR区引物，以小鼠基因组DNA为模板，利用PrimeSTARRMax DNA Polymerase高保真酶特异性扩增Mst1 3’UTR区全部序列，mMst1 3’UTR区引物序列见表1。分别用限制性内切酶Nhe I和Sal I将pmirGLO载体和Mst1 3’UTR区进行双酶切，琼脂糖凝胶电泳鉴定后用胶回收试剂盒分别回收纯化切开的目的片段及载体，使用T4DNA连接酶对线性化的载体与目的片段进行4℃过夜连接。将连接产物转化到E.coli DH5α感受态细胞，接种细菌固体培养基过夜培养12～16 h后挑选单菌落于含有抗生素的液体培养基扩大培养。将扩大培养菌液保菌后进行质粒小提，再次将重组质粒双酶切鉴定及测序鉴定。测序正确的克隆即为构建成功的重组质粒，进行无内毒素提取备用。