《表2 引物序列：发菜GPR基因(proA)克隆及其干旱胁迫下的差异表达》

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《发菜GPR基因(proA)克隆及其干旱胁迫下的差异表达》

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注:双下划线:上，下游引物5'端添加的保护碱基；单下划线:Bam HⅠ和XhoⅠ限制性酶切位点

采用CTAB法提取正常生长的发菜基因组DNA。根据本实验室转录组测序后获得的proA部分序列设计特异引物P1和P2（表2）。PCR扩增体系：94℃8 min；94℃变性50 s，49℃退火50 s，72℃延伸60 s共25个循环；72℃10 min。1.0 g/L琼脂糖凝胶电泳检测，纯化后和pMD18-T Vector在16℃连接12 h，转化感受态细胞，测序后BLAST检索和序列分析。