《表1 sgRNA克隆的引物序列》

《表1 sgRNA克隆的引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《先天性失氯性腹泻相关SLC26A3 c.392C>G(p.P131R)突变体细胞模型的建立及其作用机制的初步研究》


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利用CRISPR在线工具(http://crispr.mit.edu/),根据CRISPR/Cas9靶点设计原则生成特异性识别SLC26A3基因392位点的上下游单导RNA(single guide RNA,sgRNA)序列[3]。将SLC26A3基因序列提交至网站,并获得相应的备选序列,在正义链5'端添加CACCG,反义链5'端添加AAAC。本研究为Caco-2细胞系设计了两个位于SNP侧翼的sgRNA(sgRNA1、sgRNA2)和一个独特的供体DNA模板单链DNA寡核苷酸(ssODN)。每个sgRNA又包括一个正义链和反义链用于克隆,引物序列见表1。