《表1 CLCN7-sgRNA序列和基因组检测引物序列》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《基于CRISPR/Cas9技术构建人CLCN7基因编辑载体》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

利用Bsp QI对CRISPR/Cas9质粒进行酶切，通过Agarose凝胶电泳分离目的条带后，由胶回收方法获得线性化载体；对sg1RNA和sg2RNA进行退火实验后，分别使用T4 DNA连接酶将退火后的产物连接至线性CRISPR/Cas9载体，实验反应条件：16℃，过夜。将连接产物转化至TOP10感受态细胞中，涂布在含有氨苄青霉素抗性的LB平板上，进行克隆筛选，并使用PCR的方法（表1）鉴定目片段是否已插入，最后挑取阳性克隆进行Sanger测序，确认插入片段的序列。