《表2 转基因大豆检测的引物和探针序列(SN/T1204-2016)》

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《大豆粉转基因成分能力验证样品的检测分析》

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根据标准SN/T 1204-2016扩增反应体系中参数成分的终浓度，计算出实时荧光PCR反应体系中各外源基因tNOS、pCaMV35S、CP4-EPSPS的引物、探针及premix预混液的加入量。由于标准要求反应体系中DNA模板量加入范围值是50 ng～250 ng，用QIAGEN试剂盒同时提取的阳性样品DNA对体系反应的DNA模板量进行梯度筛选。分别设计1、2、4、6、8、10μL的DNA模板，筛选每个外源基因实时荧光PCR反应体系中最适宜的DNA模板量。引物探针待测样品外源基因采用的引物探针均按照SN/T 1204-2016设计，使用tNOS、pCaMV35S和CP4-EPSPS 3对引物和探针见表2。