《表1 大豆内源基因的引物和探针序列》

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《大豆粉转基因成分能力验证样品的检测分析》


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分别称取待测样品、对照样品各20 mg粉末置于2 mL离心管中,使用天根新型植物组DNA提取试剂盒提取样品基因组DNA。同时分别称取待测样品、对照样品各200 mg粉末置于50 mL离心管中,使用QIAGEN试剂盒提取样品基因组DNA。使用核酸蛋白仪器对DNA的纯度和浓度进行检测,并用实时荧光PCR法对样品内源基因Lectin进行检测。按照SN/T 1202-2010中的引物和探针,根据要求设置反应体系为:灭菌蒸馏水7μL、2Хpremix12.5μL、引物1μL(10μmol/L)、探针0.5μL(5μmol/L)和模板3μL。反应混合液在CFX-96 Real time PCR仪中进行扩增。反应条件设置为:50℃,2 min,95℃预变性10 min,95℃变性15 s,60℃退火延伸1 min,40个循环。内源基因的引物探针见表1。