《表1 本研究所使用的引物》

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《马铃薯热激转录因子HsfA3基因的克隆及其耐热性功能分析》


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根据NCBI网站中查到的马铃薯Hsf A3预测序列(XM_015306031.1)设计带有Xho I和Mlu I双酶切位点的引物(P1,表1)。以上述合成的c DNA作为模板,进行PCR扩增,扩增程序为94℃5 min;94℃50 s,58℃50 s,72℃90 s,33个循环;72℃10 min。PCR产物经电泳测定后通过凝胶回收试剂盒(Axygen Scientific Inc.,Union city,USA)将目的片段回收,然后将其连接至p MD19-T克隆载体中,转化大肠杆菌DH5α,经PCR检测后,对阳性克隆进行测序检验,将测序正确的菌液加甘油冻存。