《表1 本研究所使用的引物》

《表1 本研究所使用的引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
本系列图表出处文件名:随高清版一同展现
《大黄鱼与美国红鱼抗菌肽Piscidin串联基因的构建、酵母表达及抗菌活性鉴定》


  1. 获取 高清版本忘记账户?点击这里登录
  1. 下载图表忘记账户?点击这里登录

参照PSP串联基因设计,根据毕赤酵母密码子偏好性,分别合成PC1、PC2、PC3、PC4、SO5、SO6、SO7、SO8共8条引物(表1),分别用PC-piscidinpMD19-T与SO-piscidin-pMD19-T质粒为模板进行PCR扩增.扩增产物经切胶回收后进行TA克隆,送测序公司测序验证.分别用XhoⅠ、XbaⅠ和Eco31Ⅰ对测序正确的质粒进行酶切,切胶回收目的条带.加入适量浓度回收片段,与适量浓度XhoⅠ和XbaⅠ双酶切处理后的pPICZαA载体混匀,再加入T4连接酶,16℃水浴过夜连接后转化入大肠杆菌Trans5α感受态细胞[5],转化产物涂布于zeocin抗性的LB平板.利用菌落PCR方法与质粒双酶切方法筛选阳性克隆,送测序公司测序验证,获得含有目的片段的重组表达质粒pPICZαA-PSP.