《表1 本研究使用的引物》

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《柑橘溃疡病相关基因CsPGIP的克隆与表达》

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下划线标注的为酶切位点The enzyme sites are marked with underline

利用Ba Cel Lo[29]和SignalP4.0[30]进行Cs PGIP的亚细胞定位和信号肽预测；根据CsPGIP序列设计不含终止密码子的特异引物SCL-CsPGIP-f/r（表1）并以晚锦橙c DNA为模板进行PCR扩增，产物与pSAT6-m GFP-N1载体连接，构建Cs PGIP::m GFP融合基因，再将融合基因连接到pLGN-2x35s载体，最终得到pLGN::CsPGIP::mGFP载体；将含有p LGN::CsPGIP::m GFP载体和pLGN::mGFP载体的EHA105农杆菌（OD=0.1）注射洋葱下表皮，28℃暗培养36 h，制片并用荧光显微镜（OLYMPUS:BX51）观察明、暗视野下的表达情况。