《表1 本研究使用的引物信息》

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《拟南芥CKI1基因上游转录调控因子筛选及鉴定》

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下划线序列表示引物中相应的酶切位点。

因为酵母基因组比植物基因组小得多，酵母启动子一般都比较短，如果整合到酵母基因组中的外源启动子太长，可能会影响目的蛋白和启动子中顺式作用元件结合的效率，而且会造成更多的假阳性[15，16]。因此，酵母单杂交一般选用几到几十bp的特定顺式作用元件或者尽可能短的有启动活性序列来构建诱饵表达载体。首先将CKI1基因启动子平均分成若干区段，分别设计引物序列进行扩增，引物序列见表1。然后通过SacⅠ和KpnⅠ双酶切克隆到H2B-eGFP-NOST-p CAMBIA1300中间载体中，构建带有相应启动子片段的promoter-H2B-e GFP-NOST-p CAMBIA1300表达载体（图1）。