《表1 本研究使用的引物序列》

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《绿色杜氏藻类胡萝卜素羟化酶基因家族分子特征及胁迫表达分析》

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经高盐、高温、低温等诱导子处理24 h后，收集绿色杜氏藻藻液，按照RNAiso plus（TaKaRa，大连）说明书提取总RNA，-20℃下保存。利用Prime Script RT Reagent试剂盒（TaKaRa，大连）进行反转录并作为qRT-PCR检测的模板。采用TaKaRa SYBR Premix Ex TaqTMⅡ（Perfect Real Time）（TaKaRa，大连） 以表1所示的引物序列进行qRT-PCR，内参基因设置为绿色杜氏藻β-actin基因。q RT-PCR反应体系（25μL）:SYBR?Premix Ex TaqTMⅡ（2×）12.5μL，上、下游引物（10μmol/L）各1μL，模版cD-NA 1μL，无菌双蒸水9.5μL。扩增程序:95℃30s；95℃10 s，55℃30 s，40个循环；4℃保存。运用2-ΔΔCt方法对qRT-PCR的结果进行统计分析（Ruizsola et al.，2014）。