《表1 本研究中使用的引物及其序列》

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《凤丹转录因子PoDof的克隆及表达分析》


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将凤丹授粉后30、60、90和120 d的种子等量混合,总RNA提取参照RNAprep Pure多糖多酚植物试剂盒(天根)说明书进行。利用琼脂糖凝胶电泳及分光光度计进行质量检测,检测合格后取RNA反转录成cDNA,引物采用Primer Premier 6.0软件对5'RACE和3'RACE进行设计,将扩增产物纯化,回收,连接克隆载体pRACE vector载体,然后转化感受态细胞Stellar Competent Cells,进行蓝白斑筛选,PCR鉴定后挑选单克隆送测序,引物和测序由杭州擎科梓熙生物技术有限公司进行合成。RACE试剂盒购自Takara公司的Clontech SMARTer RACE5'/3'Kit。引物序列见表1。