《表1 本研究使用的引物序列》

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《大豆滞绿突变体的T-DNA插入位点分析》

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以天隆一号大豆为受体菌株，通过农杆菌介导的子叶节转化法进行转化[11]，在含有Basta（6 mg·L-1）除草剂的培养基上筛选出抗性芽，进一步通过PAT/bar转基因试纸条对抗性芽进行验证，将确认后的抗性芽嫁接，继续培养，确认突变体有滞绿表型.后用SDS法粗提植物基因组DNA，做基因组PCR检测，分别用T-DNA上引物35S-2与8c-R及载体上报告基因除草剂基因Bar-1和Bar-2（表1）进一步确定T-DNA成功插入.PCR反应体系:2.5μL 10×PCR Buffer，0.5μL 10mmol·L-1dNTPs Mix，10μmol·L-1引物各0.5 L，0.3μL 5 U·μL-1 Taq聚合酶，1μL基因组DNA作为模板，补ddH2O至25μL.PCR反应程序如下:94℃5 min；94℃30 s，58℃30 s，72℃60 s，35个循环；72℃10 min.PCR产物用1%琼脂糖凝胶电泳检测.