《表1 本研究中使用的引物》

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《越橘VcNAC072克隆及其促进花青素积累的功能分析》


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下划线表示酶切位点Underlines indicate digestion sites

从越橘转录组数据库[19]查找NAC基因,并从中筛选发现Vc NAC072高表达且在果实成熟过程中呈持续上调表达。根据筛选到的序列设计引物Vc NAC072-F/R扩增CDS(coding domain sequence)序列。以越橘果实的cDNA为模板进行PCR扩增。PCR反应程序为:98℃预变性3 min;98℃变性10 s,57℃退火30 s,72℃延伸2 min,30个循环;72℃延伸10 min。PCR产物用1.2%琼脂糖凝胶电泳并回收目的条带,连接到克隆载体p EAST blunt zero进行测序。所用的引物序列见表1。