《表1 本研究中所使用的引物》

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《短命植物小拟南芥光周期调控基因CONSTANS的克隆与表达特征分析》

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我们实验室前期完成的小拟南芥转录组数据库[24]，搜索到有1条unigene与拟南芥CO-like家族At COL1序列相似性非常高。该基因的ORF设计基因特异性引物ApCOL1-1F和Ap COL1-1R（表1），以小拟南芥的叶cDNA为模板进行RT-PCR扩增，PCR体系参照Ex Taq（TaKaRa）说明书。PCR反应程序:94℃预变性2 min，94℃变性30 s，60℃退火30 s，72℃延伸1 min 30 s，35个循环后，72℃延伸10 min。PCR产物经1.5%（w/v）琼脂糖凝胶电泳检测后，用凝胶回收试剂盒回收目的基因，连接pMD19-T载体，转化DH5α感受态细胞，提取质粒进行双酶切验证，将鉴定正确的菌液送往北京六合华大基因有限公司进行测序。