《表1 本研究中所用到的引物》

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《青海辣椒上番茄斑萎病毒检测及鉴定》


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根据已报道的番茄斑萎病毒属序列合成通用引物(表1)gL3637和gL4510C(Chu et al.,2001),以反转录获得的cDNA为模板进行PCR检测。PCR反应体系25μL:10×缓冲液2.5μL,MgCl2 1.5μL,dNTP 2.0μL,cDNA产物1μL,上、下游引物各1μL,Taq酶0.2μL,ddH2O 15.8μL。PCR反应程序:94℃预变性5 min;94℃变性45 s,46℃退火45 s,72℃延伸50 s,35个循环;72℃延伸10 min。将得到的PCR产物取5.0μL于1.0%琼脂糖凝胶中电泳检测扩增产物,阳性样品产物送南京金斯瑞公司进行序列测定。