《表1 本研究中所用到的引物序列》

《表1 本研究中所用到的引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《蔗糖:蔗糖1-果糖基转移酶基因Ao1-SST的克隆及表达分析》


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基于已发表其它植物中1-SST基因的保守序列,在NCBI网站(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)对芦笋EST库进行Blast比对,将获得的高度相似性的EST序列拼接成较长的EST,再以此较长的EST为查询序列进行Blast比对、拼接,直到达到有效延伸的程度。利用NCBI在线ORF Finder工具(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/orffinder/)预测候选基因序列开放阅读框,设计特异引物(表1)1-SSTF1和1-SSTR1,以贮藏根cDNA的模板进行RT-PCR,扩增条件参考文献(杨世鹏等,2016)。将PCR产物用琼脂糖凝胶回收试剂盒纯化,并与pMD18-T载体连接,连接产物用“热激法”转化至DH5α感受态细胞,挑取经鉴定的阳性克隆,摇菌后送样测序。