《表1 本研究中所涉及的引物序列》

《表1 本研究中所涉及的引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《河南省小麦全蚀病菌的鉴定、进化分析及标志基因筛选》


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采用菌块接种法对周麦26根系接种小麦全蚀病菌,取分别侵染0、2、3、4、5、6 d后的小麦根系,液氮速冻后于-80℃保存,以备提取RNA。采用Trizol法分别提取小麦根系的总RNA,具体操作参考说明书。将提取的高质量RNA用PrimeScriptTMRT reagent Kit进行反转录合成cDNA,将cDNA稀释10倍作为荧光实时定量PCR的模板进行扩增。20μL反应体系:2×SYBR Premix Ex Taq 10μL、上下游引物各0.4μL、cDNA模板2.0μL、ddH2O 7.2μL。反应条件:95℃预变性3 min;95℃变性10 s,60℃退火30 s,40个循环。以小麦Actin基因作参照基因(Lu,2014),分析全蚀病菌侵染小麦后诱导表达的PR基因TaPR2、TaPR4a、TaPR4b、TaPR10在接种后不同时间点的表达量(表1)。每个处理均设3次生物学重复。