《表1 本研究涉及的引物序列》

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《一种基于丝裂霉素诱导的人脂肪干细胞衰老模型》


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根据说明书,用TRIzol(Life公司)分别提取正常培养和0.5μg/ml MMC处理的细胞总RNA,并检测RNA浓度及纯度。用PrimeScriptTMRT试剂盒(TaKaRa公司)反转录合成cDNA,并以其为模版进行扩增。使用SYBRTMSelect Master Mix试剂盒(Applied Biosystems公司)在LightCycler96实时定量PCR仪(Roche公司)中进行PCR反应,反应体系为10μl,其中SYBR Green qRCR混合液5μl,上下游引物各0.5μl,灭菌水3.25μl,cDNA模板0.75μl。以GAPDH作为内参基因。引物序列见表1。