《表1 本研究中所使用的引物》

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《越橘花青苷合成相关基因VcTTG1的克隆与功能鉴定》

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采用TaKaRa公司的植物总RNA提取试剂盒（Code No.9769）分别提取越橘植株的根、一年生枝条（顶部到第1节间部分）、幼叶、花（盛花期）、绿果（花后35 d）、粉果（花后60 d）和蓝果（花后75 d）的总RNA。以总RNA为模板，使用MBI公司的反转录试剂盒（Code No.K1621）合成cDNA。用普通PCR进行序列验证，目的基因经PCR扩增、回收后进行测序。基因序列确定后进行实时荧光定量qRT-PCR分析。在越橘中，以VcGAPDH (GenBank登录号为AY123769）为内参基因测定VcTTG1的相对表达量。仪器为Bio-Rad公司的CFX Connect PCR system，试剂为ThermoFisher公司的PowerUpTM SYBR Green Master Mix (Code No.A25742）。反应体系：SYBR Mixture 10.0μL，cDNA 2.0μL，上、下游引物各0.5μL，加去离子水至20μL。PCR反应程序：95℃预变性2 min，95℃变性15 s，58℃退火15 s，72℃延伸1 min，40个循环，每次循环第2步进行荧光采集。最后采用2-??CT法分析定量数据。均设3次生物学重复。实时荧光定量qRT-PCR引物见表1。