《表2 本研究中所使用的引物》

《表2 本研究中所使用的引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《共表达PDI1、MDH1和HAC1基因对重组毕赤酵母分泌表达葡糖氧化酶的影响》


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LB培养基:酵母提取物10g/L,蛋白胨20g/L,Na Cl 10g/L。YPD培养基:胰蛋白胨20g/L,葡萄糖20g/L,酵母提取物10g/L。BMGY生长培养基:胰蛋白胨20g/L,YNB 13.4g/L,甘油10g/L,生物素4×10-4g/L,0.1mol/L pH=6.0的K2HPO4/KH2PO4缓冲液。BMMY诱导培养基:胰蛋白胨20g/L,YNB 13.4g/L,生物素4×10-4g/L,0.1mol/L pH=6.0的K2HPO4/KH2PO4缓冲液。诱导表达时,每隔24h补充1%甲醇。1.1.3试剂和引物GOD购自Sigam公司,辣根过氧化物酶购自上海生工生物有限公司。邻联茴香胺购自上海迈瑞尔化学技术有限公司。Zeocin购自Invitorgen公司。潮霉素购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司。其他常规试剂均为进口或国产分析纯。PhantaSuper-Fidelity DNA Polymerase,ClonExpress II One Step Cloning Kit购自南京诺唯赞生物科技有限公司。Ligation Mix,Yeast Protein Extraction Reagent,蛋白质电泳Maker,限制性内切酶购自大连宝生物工程有限公司。柱式酵母总RNA抽提纯化试剂盒购自上海生工生物有限公司。Bradford蛋白质浓度测定试剂盒购自上海碧云天生物有限公司。质粒提取试剂盒、PCR纯化试剂盒、胶回收试剂盒购自Axygen公司。DNA测序和引物合成由上海生工生物工程股份有限公司完成(表2)。