《表1 本研究中所用到的引物》

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《苹果花青苷调控基因MdMYB111的功能鉴定》

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设计1对引物（表1）扩增MdMYB111的编码框序列（去掉终止密码子，融合植物表达载体GFP荧光蛋白），之后连接到pLB零背景载体。用SalⅠ和Bam HⅠ对克隆载体和植物表达载体pRI101分别进行双酶切，构建重组表达载体pRI101-MdMYB111，将其导入农杆菌LBA4404。将重组农杆菌接种至30 mL含50μg·mL-1卡那霉素和50μg·mL-1利福平的YEP液体培养基，28℃振荡培养至OD600=0.6，12 000 r·min-1离心收集菌体，用30 mL ddH2O悬浮，加入乙酰丁香酮并使其浓度为100μmol·L-1，得到侵染液。取新疆红肉苹果愈伤组织浸没到侵染液中，室温振荡30 min。取愈伤组织置于含0.5 mg·L-1 6-BA+1 mg·L-1 2，4-D的MS固体培养基上，28℃暗培养2 d。随后转移到含0.5 mg·L-1 6-BA+1 mg·L-1 2，4-D+50μg·mL-1卡那霉素+250μg·mL-1羧苄青霉素的MS固体培养基上培养30 d左右（16 h光照，8 h黑暗），得到转基因愈伤组织材料。