《表1 本研究所使用的引物》

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《陆地棉苗期低温响应基因GhZAT10的克隆及功能研究》

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棉花子叶期进行4℃处理，处理时间分别为0（对照）、1、3、6和12 h，剪取棉花根、茎、叶（3个生物学重复），放入液氮速冻，-80℃保存备用。实时荧光定量PCR(Quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）分析反应体系和反应程序按照SYBR Premix Ex Taq（目录号：DRR041A）荧光定量试剂盒说明书进行，使用的荧光定量PCR仪器型号是LightCycler 480，操作方法参考分析仪说明书。通过qPrimerDB网站（https://biodb.swu.edu.cn/qprimerdb/）设计GhZAT10的qRT-PCR引物pGqZAT10（表1）。内参基因为GhActin7(Gh＿D11G0593），引物为pGhActin7（表1），每个反应设置3个重复。参考Livak等[30]报道的2-ΔΔCT方法计算基因的相对表达量。