《表1 qRT-PCR引物》

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《陆地棉NF-YA基因家族的全基因组鉴定与功能分析》

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陆地棉早熟品种鲁棉研19号（L19)[39]和晚熟品种鲁棉研37号（L37)[40]盆栽后，在培养箱中28℃/25℃培养，设置不同日照时间，长日照16 h/8 h，短日照10 h/14 h。分别采集一叶期、二叶期、三/四叶期、五/六叶期4个不同发育时期的幼叶进行实时定量聚合酶链反应（Quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）验证，每个样品3个生物学重复，分析NF-YA基因家族成员的表达模式。选取家族成员GhNF-YA4、GhNF-YA7、Gh NF-YA10、GhNF-YA12、GhNF-YA15、GhNF-YA16、GhNF-YA18、GhNF-YA22、GhNF-YA24、GhNF-YA26、Gh NF-YA28、GhNF-YA29进行定量分析。采用Prime Scrip First Strand cDNA Synthesis Kit（Takara，大连）反转录合成cDNA第1条链，使用SYBR Premix Ex TaqⅡ（Takara，大连）在LightCycle 480高通量实时定量PCR仪上进行qRT-PCR分析。引物采用Primer Premier 5.0设计，引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成（表1），actin9（AY305737）[41]为内参基因。qRT-PCR反应体积为20μL，扩增程序：95℃预变性30 s，95℃变性5 s，60℃退火30 s，72℃延伸30 s，35个循环。