《表1 qRT-PCR引物》

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《组蛋白乙酰化对灵芝生长、灵芝多糖和灵芝酸生物合成的影响》


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按照北京鼎国昌盛生物技术有限公司TRigol试剂的说明书提取灵芝总RNA,测定其OD260/280值,取1μL进行1%琼脂糖凝胶电泳分析提取的RNA纯度及检测其完整性。以此RNA为模板,用北京全式金生物技术有限公司的Trans Script One-Step g DNA Removal and cDNA Synthesis SuperMix反转录试剂盒合成灵芝cDNA。灵芝酸生物合成关键酶基因、灵芝全局调控因子基因及内参基因参考参考文献[34]和ZHANG等[36];灵芝多糖生物合成关键酶基因荧光定量PCR引物及内参基因参考JI等[29](表1)。使用美国ABI公司的Prism 7300定量PCR仪和DBI?Bioscience公司的Bestar?SybrGreen qPCR Mastermix定量PCR试剂盒进行基因表达测定。荧光定量PCR的程序参考蓝丽雯[34]的方法,表达量的计算分析采用LIVAK等[37]的方法。