《表1 引物信息：续随子二酰甘油酰基转移酶2基因(ElDGAT2)克隆与功能分析》

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《续随子二酰甘油酰基转移酶2基因(ElDGAT2)克隆与功能分析》

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本实验室将续随子的根、茎、叶、花混样及S1、S2、S3时期的种子送到安诺优达基因科技（北京）有限公司进行测序，从而得到该植物的转录组数据。利用BLAST的方法，以模式植物拟南芥（Arabidopsis thaliana L.）的AtDGAT2基因与续随子转录组数据库进行对比，并结合转录组数据功能注释发现一个编码二酰甘油酰基转移酶2，即DGAT2的转录本，命名为ElDGAT2。以该转录本序列为模板，设计PCR扩增引物（表1），以续随子S1时期的种子cDNA为模板，按照全式金2×EasyTaq?PCR SuperMix说明书的反应体系与程序进行PCR扩增，割胶回收PCR产物后，将其克隆入pMD18-T载体上，得到pMD18-T-ElDGAT2并转化大肠杆菌DH5α，菌液PCR鉴定筛选阳性克隆，送通用生物公司（安徽）进行双向测序鉴定。