《表1 引物信息:紫苏二酰甘油酰基转移酶基因(PfDGAT1)鉴定及表达分析》

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《紫苏二酰甘油酰基转移酶基因(PfDGAT1)鉴定及表达分析》


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提取晋紫苏1号的根、茎、叶、花及不同发育时期(开花后10,20,30,40 d)种子的总RNA,反转录成c DNA。根据紫苏PfDGAT1基因的c DNA序列设计荧光定量PCR特异性引物PfDGAT1-q-F/R,以紫苏18S rRNA(表1)作为内参基因[19]设计引物18S rRNA-F/R,用于实时荧光定量PCR检测。荧光定量PCR反应体系为10μL:c DNA模板0.5μL,EvaGreen 2X qPCR MasterMix 5μL,正反引物各0.3μL,ddH2O 3.9μL。扩增程序为:95℃10 min;95℃15 s,58℃60 s,40次循环;65℃5 s,95℃15 s。每个样品进行3次生物学重复和3次技术重复。采用2-ΔΔCt法计算紫苏PfDGAT1基因的相对表达量[20]。