《表1 PCR引物序列：朝仓花椒ARF基因家族的鉴定及表达分析》

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《朝仓花椒ARF基因家族的鉴定及表达分析》

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采用康为世纪公司生产的RNApure Plant Kit（DNase I）试剂盒提取植物材料总RNA，使用ABI公司生产的High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit试剂盒反转为cDNA，使用NovoProtein公司荧光定量染料NovoStart?SYBR qPCR SuperMix Plus在BIO-RAD实时定量PCR仪上进行Real-time PCR分析，每个反应3个机械重复。反应程序为:95°C预变性3 min，95°C变性10 s，60°C退火延伸60 s，共40个循环。选择ZpARF1、ZpARF13、ZpARF14、ZpARF18和ZpARF19基因作为目的基因进行表达分析，使用朝仓花椒ZpGAPDH基因（基因登录号MF152650.1）作为内参基因（刘雪薇等2018），根据各基因的基因序列，使用Primer Premier 5软件设计引物（表1）。以内参基因对表达量归一化，成熟植株以4月份叶片中ZpARF1的表达量为参照，幼龄组培苗以组培苗叶片中ZpARF1的表达量为参照，使用2-△△CT计算各基因的相对表达量，利用GraphPad Prism 7整理数据作图。