《表1 冻干保护剂单因素添加水平设计》

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《单核细胞增生李斯特氏菌标准物质冻干保存方法》

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由于不同比例的冻干保护剂，对样品的作用有很大的影响，因此，设计正交实验优化保护剂的具体成分。将脱脂牛奶、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、蔗糖、酪氨酸四种冻干保护剂设计为单因素试验，其水平设计见表1。选择L9 (34）正交表安排实验，实验设计见表2。将新鲜培养的单增李斯特菌悬液，按适当的体积比添加到保护剂中混合均匀，用无菌移液器分装至冻干瓶中，在-80℃冰箱中预冻2 h以上后按照冻干程序冻干。然后将冻干好的细菌菌粉用拍打式均质器拍碎后混匀。随机抽取样品三次，每次0.1 g，对冷冻干燥前后的活菌数进行测定，得出保护率（保护率/%=冷冻干燥后活菌数/冷冻干燥前活菌数×100）。独立重复实验A、B、C三次，以保护率为指标，记录检测结果。