《表2 因素水平表:草鱼肠道拮抗性芽孢杆菌的冻干保护剂优化研究》

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《草鱼肠道拮抗性芽孢杆菌的冻干保护剂优化研究》


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采用80℃水浴法[26]从草鱼肠道内分离并纯化芽孢杆菌,再通过牛津杯法[27]筛选出病原拮抗性芽孢杆菌。将实验室制得的病原拮抗性芽孢杆菌接种到装有灭过菌的普通液体培养基的三角瓶中,并在37℃恒温摇床中培养48h;培养后的菌悬液放入灭菌过的50 mL离心管中,并在4℃、6000r/min的冷冻离心机中离心6min后,倒出上清液,留有的沉淀既是扩增后的菌体;在沉淀中加入灭菌生理盐水洗涤细胞,去除上清液;再加入灭菌的15mL的不同保护剂溶液(表2~3),混匀后加入10mL西林瓶中,每个西林瓶加入5mL菌悬液,共3个平行组;放入-80℃冰箱24h后,移至FD5505冷冻干燥机中冷冻干燥48h,以冻干后菌体存活率为评价指标,优选病原拮抗性芽孢杆菌冻干保护剂配方,并以对照组为参照。