《表1 secda7基因全长引物及荧光定量引物》

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《甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶SeCDA7的表达与结合活性分析》

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根据甜菜夜蛾中肠转录组数据，设计secda7全长基因引物（表1）。提取甜菜夜蛾四龄幼虫中肠RNA，以反转录cDNA为模板，以secda7 F和secda7 R为引物进行PCR，扩增甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶cDNA序列片段。PCR产物经纯化后连接pMD19-T，转化DH5α感受态细胞，挑取单菌落进行双酶切鉴定后序列测定，并对secda7基因进行生物信息学分析。利用DNAMAN软件分析其开放阅读框及其氨基酸序列，NCBI Blast进行功能域分析，使用SignalP 4.1Server (http：//www.cbs.dtu.dk/services/SignalP/）进行信号肽预测，用NetNGlyc1.0 (http：//www.cbs.dtu.dk/services/NetNGlyc/）预测N-联糖基化位点。