《表1 基因名称及荧光定量RT-PCR引物》

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《沙棘果实发育阶段苹果酸代谢关键基因的表达分析》


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本研究前期已对沙棘混合样本(包括果肉,种子,根,茎和叶)的转录组进行测序,得到大量功能基因的注释以及差异表达基因的相关信息。筛选获得苹果酸代谢关键基因的片段后利用PrimerQuest在线软件进行特异性引物的设计(表1)。根据SYBR Premix Ex TaqTMⅡ(Tli RNaseH Plus)试剂盒(大连宝生物公司)方法和ABI7500 Real time PCR仪(美国Applied Biosystems公司)中的推荐程序进行荧光定量RT-PCR扩增,目的基因的相对表达量以UBQ11为内参基因(表1),采用2-△△Ct方法进行分析(Schmittgen and Livak,2008)。实验重复3次。