《表1 候选基因名称及定量引物序列》

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《干旱胁迫和复水处理下玉米差异表达转录因子基因分析》

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MYB：禽成髓细胞性白血病病毒癌基因同源物；bHLH：碱性螺旋-环-螺旋；ZFP：锌指结构蛋白；Hb：同源异型盒；下同

结合转录组数据的初步分析结果，筛选出与玉米干旱胁迫及复水相关的差异表达转录因子基因共9个，验证转录组测序结果的可靠性。依据候选基因ID（Ensemblplants，http://plants.ensembl.org/index.html）（详见表1）从玉米数据库（http://www.maizesequence.org/index.html）中检索得到对应的cDNA序列，利用Primer Premier 5.0软件进行引物设计，引物序列见表1。每个样品的RNA利用FastQuantcDNA第一链合成试剂盒（天根公司，北京）合成c D-NA。以玉米18S RNA为内参基因（GenBank No.AF168884.1），利用CFX96实时荧光定量PCR仪（Bio-Rad，美国），参考SYBR Premix Ex TaqTM（TaKaRa，大连）试剂盒说明书，反应在Bio-red CFX96荧光定量PCR仪上运行，PCR反应体系为20μL，SYBR Green Premix Ex TaqⅡ10μL，上、下游引物（10μmol/L）各1μL，cDNA 1μL，ddH2O 7μL。反应程序：95℃30 s；95℃15 s，60℃30 s，40个循环。根据2-ΔΔCt法（Livak，Schmittgen，2001）计算基因的相对表达量，每个基因的定量设置3个生物学重复，计算标准差。