《表1 实时荧光定量RT-PCR所用引物》

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《基于RNA-seq数据发掘响应干旱的谷子C2H2型锌指蛋白基因》

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参照RNAiso Plus、PrimeScriptTMRT reagent Kit（TaKaRa）使用说明，从各处理样品中提取总RNA以及合成cDNA。根据基因序列信息，采用软件Primer 5.0进行real-time RT-PCR特异性引物设计（表1）。使用美国Bio-Rad CFX96TM Touch Real-Time PCR System对基因进行相对定量RT-PCR分析。两步法PCR反应程序:95℃预变性30 s；95℃5 s，60℃30 s，40个循环。每个样品重复3次，以β-actin作为内参，用2-ΔΔCT的方法计算基因的相对表达量，基因在处理0 h时的相对表达量设定为1。