《表3 融合蛋白重组质粒和抗体重组质粒的最佳电转条件汇总》
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《融合蛋白基因与抗体基因电转染CHO-S细胞的条件摸索优化》
采用不同的电转染程序(U-023、U-024、U-030)电转CHO-S细胞,48 h后检测细胞的活率(2-A)、细胞的密度(2-B)及细胞的蛋白表达量(2-C),结果发现U-030程序下细胞的密度虽然最低,但与其他电转程序下的细胞密度相比,差异并不是特别明显,且该细胞的蛋白表达量最高,因此确定最佳电转染程序为U-030;同理对电转染质粒的用量进行摸索(2-D-F),确定最佳质粒用量为20μg/孔;对电转染细胞的用量进行摸索(2-G-I),确定最佳的细胞用量为1×107个/孔,最终确定该分子转染CHO-S细胞的最佳电转程序为U-030,最佳质粒用量为20μg/孔,最佳细胞用量为1×107个/孔。抗体重组质粒电转染条件摸索结果见图3,其中包括对电转程序的摸索结果(3-A-C)、质粒用量的摸索结果(3-D-F)及细胞用量的摸索结果(3-G-I),最终确定该分子转染CHO-S细胞的最佳电转程序为U-024,最佳质粒用量为15μg/孔,最佳细胞用量为1×107个/孔,两分子的最佳转染条件汇总见表3。
图表编号 | XD0041599000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.04.26 |
作者 | 邓晓芬、杨晓佳、易天红、冯英、柯潇、赖维莉 |
绘制单位 | 成都康弘药业集团股份有限公司产品技术中心、成都康弘药业集团股份有限公司产品技术中心、成都康弘药业集团股份有限公司产品技术中心、成都康弘药业集团股份有限公司产品技术中心、成都康弘药业集团股份有限公司产品技术中心、成都康弘药业集团股份有限公司产品技术中心 |
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