《表3 ClanGV的PIF间相互作用的酵母双杂交结果》

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《杨扇舟蛾颗粒体病毒经口侵染因子PIF0～PIF6间分子互作的酵母双杂交验证》

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U:单向互作；B:双向互作；–:没有发生互作；NA:不适用。U:Unidirectional interaction；B:bi-directional interaction；–:no interaction；NA:not applicable.

将重组诱饵载体和重组捕获载体共转化酵母细胞后，观察在缺陷型培养基SD/-Trp-Leu-His-Ade上的生长情况，结果显示，涉及到PIF1～PIF4两两间的12个转化组均激活了报告基因的表达，分别为转化组A1B2、A1B3、A1B4、A2B1、A2B3、A2B4、A3B1、A3B2、A3B4、A4B1、A4B2、A4B3（图2-A～D），说明ClanGV的经口侵染因子PIF1、PIF2、PIF3和PIF4之间存在两两的双向互作现象。利用酵母双向互作方法研究蛋白互作时还能检测到目的蛋白同时作为诱饵载体和捕获载体时的互作情况，即目的蛋白自身是否存在互作，结果证明了ClanGV的经口侵染因子PIF1、PIF2、PIF3和PIF4均存在自身互作现象，转化组分别为A1B1、A2B2、A3B3、A4B4（图2-A～D）。另外，本研究通过酵母双杂交试验还证明了6个单向互作组:B1A5（图2-A）、B3A5（图2-C）、B4A0和B4A5（图2-D）、B6A3和B6A4（图2-E），即PIF5作为捕获载体时分别能与PIF1、PIF3和PIF4发生互作，PIF6作为诱饵载体时分别能与PIF3和PIF4发生互作，PIF0作为捕获载体时能与PIF4发生互作（表3）。