《表2 NcGRA16和NcMYR2基因敲除质粒构建和DHFR同源重组基因片段制备所用引物》

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《新孢子虫GRA16和MYR2基因功能的初步研究》

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通过ToxoDB数据库寻找NcGRA16和NcMYR2基因序列，并寻找包含PAM序列结构的前间隔序列（protospacer），通过http：//nebasechanger.neb.com/网站设计protospacer前后同源序列（引物序列见表2），使用Q5点突变试剂盒合成Nc-pSAG1-Cas9:U6-SgUPRT-NcGRA16和Nc-pSAG1-Cas9:U6-SgUPRT-NcMYR2载体，并进行测序鉴定。