《表3△NcGRA16和△NcMYR2虫株PCR鉴定引物》

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《新孢子虫GRA16和MYR2基因功能的初步研究》


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将上述重组质粒和同源重组片段分别以6μg和2μg的量混匀,用Cytomix缓冲液稀释至100μl。将其与1×107个/300μl新孢子虫混匀,加入到-20℃预冷的无菌4mm电击杯中,电穿孔后迅速将样品加入到含有1μmol/L乙胺嘧啶的HFF细胞中。然后传代至含有1%FBS及1μmol/L乙胺嘧啶的HTERT细胞。96孔板中进行单克隆筛选,并进行PCR(引物见表3)、Western blot和IFA鉴定。