《表1 PCR鉴定所用引物序列》

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《杂草稻抗白叶枯病基因的筛选与鉴定》


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采用CTAB法提取杂草稻基因组DNA[7]。Xa21的引物为PTA248[8],Xa23的引物为M-Xa23[9],Xa7的引物为RM20582[10],引物由上海生工生物工程股份有限公司合成,引物序列见表1。PCR反应体系为10μL,5μL 2×Taq PCR MasterMix(含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2),1μL模板,1μL引物,3μLdd H2O。反应程序:95℃预变性5min;95℃变性30s,55℃退火(温度随引物而异)30s,72℃延伸45s,35个循环;72℃延伸10 min,20℃停止、保存。PCR扩增产物用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳,再经银染、显影等程序,得到扩增条带。