《表1 本研究所用PCR引物序列》

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《小拟南芥激素相关基因及GH3.6的克隆与表达》

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注:下划线部分表示酶切位点。

采用qRT-PCR技术分析基因组织表达情况。基因特异引物为ApGH3.6-RT-F和Ap GH3.6-RT-R，内参引物为GAPDH-F和GAPDH-R[34]（表1）。qRT-PCR使用Fast SYBR Mixture试剂盒（康为世纪），美国ABI 7500 Fast实时荧光定量PCR仪（LifeTechnologies，Foster City，CA，USA）进行扩增。反应程序为95℃10 min，95℃15 s，60℃1 min，循环数为40，60℃读取荧光值。对每份样品的目的基因和内参基因的Ct值进行检测，每份样品3次重复。实验数据采用2-ΔΔCt法进行相对定量分析[35]。结果基于3次独立实验，每组实验重复3次，采用SPSS17.0软件对实验结果进行单因素方差分析[32]，利Duncan法进行多组样本之间的差异显著性分析（P<0.05）。