《表1 本研究中所用PCR引物信息》

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《LncRNA在柑橘木虱与黄龙病病原菌互作中的差异表达分析及验证》

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为验证生物信息预测的带菌与无菌成虫中lncRNA的差异表达，选取赣州品系带菌与无菌成虫采用相应引物（表1）进行实时荧光定量PCR(realtime fluorescene quantitative PCR，qPCR）扩增，以验证lncRNA的表达。20μL qPCR反应体系：2×ChamQTM SYBR?qPCR Green Master Mix 10μL、10μmol/L上下游引物各0.4μL、ROX II 0.4μL、cDNA模板2μL、灭菌双蒸水6.8μL。采用两步法反应程序：95℃预变性3 min；95℃变性5 s，60℃退火并延伸31 s，共40个循环。结束后进行熔解曲线分析，采用比较Ct值的相对定量法（2-ΔΔCt法），ΔCt=Ct-目的基因-Ct-内参基因；ΔΔCt=(Ct-目的基因-Ct-内参基因）试验组-（Ct-目的基因-Ct-内参基因）对照组（Livak&Sch-mittgen，2001）。所有试验均设3次生物学重复。