《表1 本研究所用的q PCR引物序列》

《表1 本研究所用的q PCR引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《长基因间非编码RNA 472靶向微小RNA-942-5p对非小细胞肺癌细胞上皮间质转化的影响》


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注:F,上游引物;R,下游引物

TRIzol提取转染48 h后细胞的总RNA,采用一步法试剂盒进行q PCR:将1μg总RNA与1μl 10×ez DNaseTMBuffer和1μl ez DNaseTMEnzyme混匀,Nuclease-free H2O补齐至10μl制备模板RNA,q PCR反应体系包含10μl模板RNA、25μl 2×PlatinumTMSuper FiTMRT-PCR Master Mix、2.5μl上下游引物和0.5μl Super ScriptTMIV RT Mix,Nuclease-free H2O补齐至50μl,反应条件:60℃10 min,98℃2 min,40个循环的98℃10 s、55~72℃10 s和72℃30 s,最后72℃延伸5 min。采用2-ΔΔCt表示LINC00472、E-cad、N-cad和Vim相较于GAPDH或miR-942-5p相较于U6的相对表达量。引物序列见表1。