《表2 Q-PCR所用引物序列》

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《重组腺病毒p53基因诱导舌癌细胞株SCC-15凋亡的研究》

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RT-PCR、Q-PCR检测p53及其相关促/抗凋亡基因的表达水平：收集不同滴度的Ad-p53-Ds Red或Ad-Ds Red作用72h后的SCC-15细胞，PBS清洗2遍，加入Trizol裂解液，冰浴条件下，提取细胞总RNA。使用蛋白/核酸分析仪检测A260/280比值，分析RNA纯度，并计算其含量。按照Revert Aid First Strand c DNA Synthesis Kit试剂盒说明书进行反转录，获得c DNA。普通PCR检测Mdm2、P53、P21、β-actin的m RNA表达变化，各引物序列及反应条件如表1所示，采用GelPro凝胶成像仪进行拍照及灰度分析；进一步采用Q-PCR检测P53、β-actin、Bcl-2、Bax的表达变化，按照SYBR Green Realtime PCR Master Mix试剂盒说明书进行PCR操作，PCR反应条件为：95℃预变性20s，(95℃变性15s，60℃复性60s）进行40个循环，基因引物序列见表2。