《表1 Q-PCR扩增引物序列》

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《CAFs调控MAPK/ERK5通路抑制结直肠癌HT-29细胞凋亡》

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收集与CAFs共培养24 h后的HT min 29细胞，使用Trizol法提取细胞总RNA，检测RNA的纯度之后按照PrimeScript TM RT Reagent Kit逆转录试剂盒操作步骤对RNA进行逆转录，采用SYBR Green染料法进行定量PCR，按照SYBR Premix Ex Taq荧光定量试剂盒说明书进行PCR体系配制，反应体系在LightCycler誖480实时PCR系统进行，采用两步法进行PCR反应，反应条件:95℃30 s，95℃5 s，60℃30 s，40个循环后绘制溶解曲线。以GAPDH为内参对照，使用软件自动得出的Ct值计算出相对表达量。每组均做3个复孔，实验重复3次。VEGF和GAPDH的Q-PCR引物序列（表1）。