《表1|q-PCR的相关引物序列》

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《人胎盘间充质干细胞来源外泌体保护氧化应激损伤肺上皮细胞的机制》

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按照总RNA提取试剂盒操作步骤进行RNA提取，按照反转录试剂盒操作程序进行反转录反应，RNA的量为200 ng，加入反转录引物（1μmol/L）1μL，加无菌水至总体积为12μL，65℃孵育5 min，放置冰上预冷2 min，加入5×Reaction buffer 4μL，Ribo Lock RNase抑制剂1μL，10 mmol/L d NTP 2μL，Revert Aid M-Mu LV反转录酶1μL，至总体积为20μL，25℃5 min，42℃60 min，70℃5 min，得到反转录产物。20μL q-PCR反应体系：1μL模板（反转录产物），1μL引物混合物（10μmol/L），10μL 2×SYBR green，8μL水。反应条件：95℃10 min，95℃15 s，60℃30 s，40个循环；60-95℃绘制熔解曲线，以GAPDH为内参基因，以2-ΔΔCt（Ct代表循环阈值）表示基因的表达量，引物序列见表1。