《表1 Q-PCR所用引物序列表》

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《Leptin过表达对猪前脂肪细胞脂滴形成的研究》


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用TRIzol提取总RNA,使用Prime-Script RT试剂盒从总RNA合成cDNA,用Q-PCR评估脂滴分化及脂质合成代谢相关基因的m RNA表达水平。Q-PCR实验使用的PCR引物(表1)由Primer5.0软件设计,并由北京擎科生物技术有限公司合成。20μL Q-PCR反应体系:2×SYBR Green Master Mix10μL,ddH2O 7μL,10μmol Forward primer 1μL,10μmol Reverse primer 1μL,cDNA 1μL。Q-PCR特异产物通过溶解曲线分析,相对Ct值法即X=2-ΔΔCt测定相对基因表达变化。