《表1 各基因q-PCR引物序列》

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《miR-486-5p通过负向调控AMPK/Sirt1信号通路参与肝细胞性肝癌细胞增殖》

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将处理后的细胞按照TRIzol RNA提取试剂盒说明，提取细胞总RNA并使用NanoDrop 2000对RNA浓度和纯度进行检测。参照cDNA合成试剂盒操作步骤将500 ng总RNA逆转录为cDNA。取10 ng cDNA作模版，25μL q‐PCR反应体系，反应程序：95℃15 min，95℃5 s，60℃30 s，扩增35个循环，引物序列见表1。以U6为内参，采用2-△△Ct法计算miR‐486‐5p相对表达量，以ACTB为内参计算CCND1、CCNE、CDK4、CDK6 mRNA的相对表达量。