《表2 功能区域片段q-PCR验证引物序列》

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《肿瘤相关基因AMER1不同功能段表达载体的构建及其在人肺腺癌A549细胞中的表达》

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收集转染后生长密度达80%～90%的A549细胞，用预冷的PBS清洗2遍，加入适量的胰酶消化，用胎牛血清终止消化，离心收集细胞沉淀，按培养细胞/细菌总RNA提取试剂盒说明提取细胞总RNA，将其反转录为cDNA，以其为模板，荧光定量PCR法扩增AMER1基因不同截短片段，以GAPDH为内参，引物序列见表2。引物由上海英潍捷基基因技术有限公司合成。反应条件：95℃变性15 s，60℃退火30 s，72℃延伸3 min，共35个循环。检测各复孔的Ct值，以2-△△Ct表示AMER1基因mRNA转录水平。