《表1 功能区域片段引物序列》

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《肿瘤相关基因AMER1不同功能段表达载体的构建及其在人肺腺癌A549细胞中的表达》

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注：上游引物下划线部分为EcoRⅠ酶切位点，下游引物下划线部分为KpnⅠ酶切位点；前3个CCG为保护碱基，GCCACC为Kozak序列。

AMER1基因CDS区全长3 408 bp，以人基因组DNA为模板，PCR扩增AMER1基因全长及5个不同功能区域片段2-1135AA、2-327AA、2-785AA、327-785AA、785-1135AA及327-1135AA，引物序列见表1。引物由上海英潍捷基基因技术有限公司合成。PCR反应体系为：GoTaqcolorless Master Mix 12.5μL，Upstream primer 2μL，Downstream primer 2μL，DNA template 2μL，Nuclease-Free Water to 25μL；PCR反应条件为：94℃15 s，60℃30 s，68℃3.5 min，共35个循环。