《表1 引物序列及预期片段大小》

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《烟草NtMLO家族全基因组序列鉴定及表达分析》

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根据NtMLO基因的CDS设计荧光定量特异引物，选用烟草Actin基因（NTU60495）为内参基因，并设计定量PCR引物Ref-RT-F和Ref-RT-R（表1）。采用SYBR Green法在ABI Vii7实时荧光定量PCR仪上进行实时荧光定量PCR实验，每个组织设置3次生物学重复和3次实验重复，PCR反应体系和反应程序参照TaKaRa定量PCR试剂盒说明书。对熔解曲线、扩增效率和相关系数进行分析，选取特异性好、扩增效率接近1的引物进行实验，分析NtMLO基因在烟草不同组织中的表达情况。将花中各基因的相对表达量设置为1，其余组织中的相对表达量按照2-??CT法进行计算。